Препаративная энзимология

Курс предназначен для студентов кафедры биохимии IV-го года обучения, осваивающих практические навыки работы в рамках Большого практикума кафедры, и дает возможность студентам научиться самостоятельно работать в области экспериментальной энзимологии. Занятия, как правило, проходят ежедневно с 1 сентября по 15 октября (VII семестр), ежедневно с 09:30 до 17:30. Имея в своем распоряжении полный рабочий день, студенты могут использовать для решения поставленных задач такие требующие много времени на подготовку и проведение процедуры, как экстракция, хроматографическое разделение и электрофоретический анализ ферментных препаратов.

Курс подразделяется на три раздела:

1. выделение фермента гликолиза из скелетных мышц кролика или курицы,
2. очистка фермента до гомогенного состояния (для ряда ферментов проводят очистку несколькими способами (перекристаллизация, ионно-обменная хроматография, гель-фильтрация), что позволяет расширить круг навыков студента),
3. определение кинетических параметров фермента (активности, константы Михаэлиса).

В качестве дополнительных заданий студенты синтезируют препараты субстратов и исследуют влияние ингибиторов на активность ферментов. После успешного завершения основной части работы студентам предлагают выполнить небольшую исследовательскую работу с применением полученного ферментного препарата. Каждый раздел предваряется семинарским занятием, обеспечивающим теоретическую подготовку студентов для проведения экспериментальной работы. В ходе семинаров обсуждаются такие темы, как выделение и очистка ферментов, общие представления о катализе, ферменты как биологические катализаторы, активность фермента, методы определения ферментативной активности и кинетика ферментативных реакций.

После завершения практической части, студенты отчитываются о выполненной работев форме доклада с устной презентацией полученных данных и в форме письменного отчета, который оформляют по правилам написания статей в научные журналы (в качества образца мы предлагаем «Правила для авторов» журнала «Биохимия»).